Thursday, December 27, 2012

Cara membuat perlakuan beberapa hormon pada media MS

Langkah-langkah dalam membuat percobaan pengaruh hormon, dengan membuat beberapa media dengan komposisi hormon yang berbeda-beda.  Misalkan kita akan mempelajari pengaruh hormon IBA terhadap pertumbuhan akar mikro shoot Eucalyptus pada media MS.  Misalkan kita akan menguji 10 jenis media dengan IBA yang berbeda-beda.
Contoh : R0......................................IBA 0 (kontrol)
  1.  R1.........................................IBA 0.2
  2. R2..........................................IBA 0.4
  3. R3..........................................IBA 0.6
  4. R4..........................................IBA 0.8
  5. R5..........................................IBA 1.0
  6. R6..........................................IBA 1.2
  7. R7..........................................IBA 1.4
  8. R8..........................................IBA 1.6
  9. R9..........................................IBA 1.8
  10. R10........................................IBA 2.0

Buat media MS tanpa hormon dalam flask 500 ml sebanyak 250 ml, sesuai dengan jumlah perlakuan diatas dan diautoclave.

Siapkan hormon IBA dalam botol keci dan juga diautocalve bersamaan dengan media yang dibuat tadi.
Siapkan juga fin tip dan finpipette yang sudah diatoclave, dan juga botol steril sesuai dengan kebutuhan


Setelah media dan hormon siap digunakan pada keesokan harinya. 

Siapkan micro wave dan peralatan lain


Bekerja di dalam laminar.
  1. hidupkan laminar dan sterilkan permukaannya
  2. gunakan jas lab dan masker, dan siapkan sarung tangan
  3. siapkan micro wave dan nyalakan
  4. masukkan media MS tanpa hormon yang sudah memadat untuk dicairkan kembali dengan bantuan panas dari micro wave
  5. Setelah media MS encer kembali (mendidih), keluarkan dari microwave dan masukkan ke dalam laminar.
  6. Buka alumunium foil, dan masukkan hormon IBA sesuai dengan perlakuan, misalnya IBA 1, maka teteskan sebanyak 0.25 ml, atau 250 ul IBA kedalam media yang sudah encer tadi lalu digoyang-goyang agar hormon tersebar merata.
  7. tuang media yang sudah encer dan dicampur hormon ke dalam botol steril
  8. tutup botol yang sudah diisi semua, dan diberi label pada masing-masing botol
  9. diamkan media yang encer agar mengeras kembali.
  10. tunggu beberapa lama, hingga semua media mengeras dan siap untuk digunakan
Selamat Mencoba



No comments:

Post a Comment